邻二氮菲光度法测定铁-邻二氮菲分光光度法测定微量铁的实验中加入试剂的顺序能否任意改变？为什么？

发布时间：2018-01-17 所属栏目：水分活度测定仪

一 : 邻二氮菲分光光度法测定微量铁的实验中加入试剂的顺序能否任意改变？为什么？

邻二氮菲分光光度法测定微量铁的实验中加入试剂的顺序能否任意改变?为什么?

邻二氮菲分光光度法测定微量铁的实验中加入试剂的顺序能否任意改变？为什么？的参考答案

不能.

加入的试剂的作用分别是：盐酸羟铵是还原剂、邻二氮菲是显色剂、NaAc溶液是缓冲溶液用来控制溶液的PH值（测定时,若酸度较高反应进行较慢,酸度太低则二价铁离子水解,影响显色）.

加还原剂是为了把Fe3+还原为Fe2+,必须先加,这是因为Fe2+与邻二氮菲可生成稳定的桔红色配合物[Fe(phen)3]2+,Fe3+也能与邻二氮菲生成淡蓝色[Fe(phen)3]3+,盐酸羟胺作为还原剂把三价铁还原成二价铁离子,让其与邻二氮菲形成稳定络合物,若在还原剂前先加显色剂邻二氮菲,邻二氮菲会与Fe3+络合,其与三价铁的络合物不如与二价铁的络合物稳定,也就是络合不够完全,不能准确得出铁的含量.

二 : 邻二氮菲分光光度法测定几种日常食物中的铁含量

摘要利用有机物破坏法消化样品，再采用邻二氮菲分光光度法测定常见食品中铁的含量。该方法操作简便、准确性高、重复性好。为人们选择食物补充每日所需铁量提供一定的理论依据。

关键词微量铁测定分光光度法
中图分类号：O657.32 文献标识码：A DOI：10.16400/j.cnki.kjdkz.2015.03.018
-Phenanthroline Spectrophotometry method to Determine
Microelement Iron in Several Kinds of Common Food
YIN Hui， SHI Hongjin， LONG Chunyue， ZHAO Bo
（North Sichuan Medical University， School of Basic Medical Sciences analysis center， Nanchong， Sichuan 637000）
Abstract The samples have been decomposed by using organic degradation. Microelement Iron in Several Kinds of Common Food had been determined by o-phenanthroline spectrophotometry. The method is simple operation， high accuracy and good reproducibility. The result provides the theoretical basis for people choosing common food to replenish iron.
Key words Microlelement， Determine， Spectrophotometry
在人体内含量最为丰富的微量元素是铁，对人体的正常代谢起着非常重要的作用。铁在肌红蛋白、血红蛋白、细胞色素及其他酶系统的构成上起重要作用。①在氧的转运和利用、脂肪氧化、能量代谢以及免疫功能和神经系统的发育上都起着至关重要的作用。②通过膳食摄取是人每日获得所需的微量铁的最主要途径。所以，如何选择果蔬、肉类适当摄取每日所需微量铁很为关键。(www.61k.com）本研究以日常食用较多的果蔬、肉类为原料，测定其含铁量的差异，以此为选择食物补充每日所需铁量提供理论依据。
现阶段测定微量元素最常用的方法是采用分光光度法，由于该方法操作简便、准确性高。③④⑤因此，本文在pH值4～6的条件下，⑥利用盐酸羟胺与三价铁作用得到二价铁，二价铁再与邻二氮菲生成桔红色络合物，采用分光光度法测定样品中铁的含量。
1 材料与方法
1.1 仪器
721-100型分光光度计，上海舜宇恒平科学仪器有限公司;JA5003N型电子天平，上海佑科仪器表有限公司;GW-4-10马弗炉，金坛市国旺实验仪器厂。
1.2 材料与试剂
市售新鲜苹果、梨、空心菜、白菜、猪肉、兔肉。
20ug/mL的铁标液（临时配制）;10%的盐酸羟胺（临时配制）;0.2%的邻二氮菲溶液（临时配制）;2mol/L的盐酸溶液（临时配制）;1mol/L的醋酸钠溶液。
1.3 实验步骤
1.3.1 样品处理
将市售新鲜的苹果、梨、空心菜、白菜、猪肉、兔肉洗净，晾干;准确称取50g样品，用剪刀剪碎，再用碾?j进一步碾碎，放在电磁炉上加热至不再出现浓烟为止。然后放入马福炉高温烘烤4个小时，取出，冷却至室温。加入2 mol/L盐酸5mL ，加热待有棕色出现，再逐滴加入浓硝酸直到不再变棕色，继续加热几分钟。冷却后过滤，将滤液转移至50mL的容量瓶，并用2 mol/L盐酸洗涤滤渣2～3次，清液转移到容量瓶中，定容，贴上标签，待用。
1.3.2 铁标准溶液的配制
取6支50mL的容量瓶，分别加入20ug/mL的铁标准液0mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL，依次加入10mL的盐酸羟胺1.5mL，摇匀，静置5分钟后加入1mol/L的醋酸钠5mL，0.2%的邻二氮杂菲溶液2mL，定容，静置30min。
1.3.3 样品溶液的配制
另取10支50mL的容量瓶，分别各加入样品苹果、梨、空心菜、白菜、猪肉、兔肉样液5mL和10mL，依次加入10mL的盐酸羟胺1.5mL，摇匀，静置5分钟后加入1mol/L的醋酸钠5mL，0.2%的邻二氮杂菲溶液2mL，定容，静置30min。
1.3.4 吸光度的测定
以0.00 mL铁标准溶液为空白参比，在510 nm波长下，用1 cm比色杯测定铁标准溶液和样品溶液的吸光度。
2 结果与讨论
2.1 标准曲线绘制
表1 标准溶液吸光度与铁含量
铁标准溶液的吸光度如表1所示。以铁含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线结果如图1所示。
2.2 样品的铁含量
各种样品的铁含量见表2。
（下转第43页）（上接第36页）

图1 铁含量的标准曲线
表2 样品的铁含量
对样品溶液分别移取5mL和10mL，进行两组平行实验。由表2可知使用该方法进行微量铁的测定重复性好、准确度高。
3 结论
本实验采用分光光度法测定了几种果蔬、肉类等样品中的铁含量，该方法能简便、快速、准确地测定出样品中的铁含量。从实验结果可以看出梨的铁含量相对较高，而白菜的铁含量最低。为选择食物补充每日所需铁量提供一定的理论依据。
注释
① 刘辉，田亚红.邻菲罗啉分光光度法测定蔬菜中铁的含量[J].化学与生物工程，2008.25（3）：77-78.
② 杨爱萍.几种蔬菜水果中铁含量的测定[J].江苏农业科学，2012.40（12）：340-341，344.
③ 中国国家标准化管理委员会.GB/T 5009.90―2003食品中铁、镁、锰的测定[S].北京：中国标准出版社，2003.
④ 徐慧琴，宋淑红.分光光度法测定常见食品中铁的含量[J].山东化工，2013.42（12）：84-85.
⑤ 田志美，宋崇富.邻二氮菲分光光度法测定4种食品中铁元素的含量[J].贵州大学学报（自然科学版），2014.31（3）：30-32.
⑥ 武文，宣亚文，田友华，等.分光光度法测定蔬菜中铁的含量[J].广东农业科学，2011（2）：169-170.